胚胎体外培养（In Vitro Culture, IVC）是胚胎工程领域的核心技术环节，培养液作为胚胎体外生长的核心微环境，其成分组成直接决定胚胎发育潜能及后续实验的可靠性。本文将从培养液的核心成分、性能特征及适用场景等方面对CZB、KSOM与M16三款经典胚胎培养液进行系统比对，为胚胎培养相关实验的培养液选择提供科学依据。

核心成分解析与量化对比（单位：mM）

共性特征分析：三款培养液的核心优势

缓冲系统：三款培养液均含25 mM左右的NaHCO₃，该成分可与培养环境中的CO₂形成稳定缓冲对，确保培养液pH值维持在胚胎发育适宜的7.2-7.4范围，为胚胎提供CO₂缓冲系统。

能量底物：均同时提供丙酮酸和乳酸两种能量物质，支持胚胎从氧化磷酸化到糖酵解的代谢模式转换，满足不同发育阶段的能量需求。

基础离子：均包含Na⁺、K⁺、Ca²⁺、Mg²⁺等基础离子，通过离子平衡调节渗透压，保障细胞信号传导的正常进行。

不同培养液适用场景

KSOM —— 极低葡萄糖（0.20 mM）+氨基酸支持的黄金组合，适合小鼠合子至囊胚全程培养；低渗透压（~256 mOsm），更接近输卵管液环境。

CZB —— 高乳酸钠（28 mM），其能量底物组合偏向于支持糖酵解，支持从受精卵到桑葚胚的早期发育。

M16 —— 高葡萄糖（5.55 mM）+高丙酮酸（0.33 mM），氧化磷酸化支持型，更有利于能量需求巨大的囊胚形成和扩张，但需注意早期代谢压力。

表2 不同培养液中C57BL/6J小鼠胚胎发育率的比较^[1]

培养液的保存

胚胎培养液未开封可保存3个月（按说明书条件保存）；开封后需要在2周内使用。使用污染或成分变化的培养液可能导致胚胎分裂迟缓、碎片增多、囊胚形成率下降等胚胎发育异常，甚至引发实验室交叉污染，影响实验的正常进行。

超期的风险

• pH失衡：胚胎培养液通常需维持特定pH（7.2-7.4）和渗透压。开封后，CO₂逸出可能导致pH升高（偏碱性），破坏胚胎生长的酸碱平衡；

• 氧化损伤：某些成分（如氨基酸）接触空气后可能氧化失效，或产生自由基，损害胚胎细胞；

• 营养断供：丙酮酸、乳酸等小分子物质可能因挥发导致浓度下降，生长因子如BSA可能因温度波动而变性；

• 渗透压紊乱：水分蒸发导致培养液渗透压升高，影响胚胎存活。

• 无菌环境被破坏：即使操作规范，多次开盖、吸液等操作仍可能引入环境中的微生物。

培养液保存tips:

1. 标记开封日期：严格记录开封时间，超期后废弃。

2. 避免温度波动：开封后存放于稳定环境（如培养液专用冰箱）。

相关产品

产品名称	货号	备注
KSOM培养液	M1435	添加氨基酸，高质量囊胚培养优选
KSOM培养液（无EAA、NEAA）	M1436	常规培养，稳定突破早期发育阻滞
CZB培养液	M1655	专为克服小鼠胚胎体外培养中2-cell阻滞而设计
CZB-Hepes培养液	M2750	HEPES缓冲体系，提供稳定的非CO₂依赖环境
M16培养液	M1735	高葡萄糖含量，支持后期囊胚腔快速形成

参考文献

[1]贾青, 高娟, 杨博，等人. 小鼠体外受精及其胚胎体外培养的比较研究 [J] 实验动物与比较医学. Oct．2008．28(5).